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应用FISH法对污水生物处理系统中细菌数量的计数

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【中文关键词】 FISH法  污水处理工艺  
【摘要】 本文介绍了应用FISH法对污水处理工艺中细茵数量的计数方法。同时介绍了活性污泥试样制作、FISH法观测试样的制作以及各种试剂的配制、作用以及使用方法,基因探针的选择原则、杂交方法等实际操作方法与过程。
【部分正文预览】

20纪60年代,分子生物学技术的出现,使得在分子级别上进行生命现象研究得到了快速的发展。一系列新技术方法的应用,将环境微生物的研究从传统方法提升到新的高度[1 ]。FISH(Fluo—rescence in Situ Hybridization,荧光原位杂交)法作为一项对细胞及细菌等微生物研究的有效手段,可以定性及定量的对绝大多数微生物进行实时观测研究[2矗 ]。1989年Delong等人为了检测出特异微生物的存在,首先对细菌的16S rRNAE6]通过原位杂交进行荧光标的,再应用荧光显微镜进行观测,从而正式确立了F1SH法在生物组织微观研究中的应用。该方法于1990年首次应用到活性污泥的研究中,目前已经在环境微生物全方位的研究中得到普及。早期的研究一般采用此方法对细菌种类的确认以及时间与空间分布等的定性研究方面。最近,关于应用FISH法对观测对象进行计数的相关研究多有报道,Okabe等人于2003年曾经对旋转盘式生物膜法水处理装置中的生物膜在脱氮菌的处理机能进行研究时,应用FISH法对硝化菌进行了定量计数观测ET],研究结果证明了定量研究的可行性。Tamatubo等人在所进行的关于石油污染的生物清除过程中对Alkanes及芳香族有机物质具有分解机能的Alcanivorax菌进行了计数观测研究,同样取得了理想的研究成果[5】。

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