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基于RT-qPCR 选择性检测水中活性病原菌

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【中文关键词】 逆转录定量PCR  RNA  大肠杆菌  粪肠球菌  活性菌  
【摘要】 环境水体中病原菌的快速检测是有效控制与预防传染性疾病暴发、保障水质卫生学安全的技术关键. 目前,病原菌传统检测方法是培养法,然而,研究发现,细菌在环境压力下可以进入“具有活性但不可培养。
【部分正文预览】
环境水体中病原菌的快速检测是有效控制与预防传染性疾病暴发、保障水质卫生学安全的技术关键. 目前,病原菌传统检测方法是培养法,然而,研究发现,细菌在环境压力下可以进入“具有活性但不可培养( viable but nonculturable,VBNC) ”[1 ~ 4]的状态,无法用常规培养法检出,但VBNC 病原菌仍然保持代谢活性和致病性[5,6],能够在环境压力解除后恢复其可培养性,引发严重的微生物安全风险[7,8]. 基于RNA 的PCR 技术是解决这一问题的途径之一[9, 10]. 与DNA 相比,RNA 在环境中不稳定,半衰期甚至只有几分钟,因此RNA 可以作为活性病原菌存在的分子信标[11, 12]. 近年来,已有研究报道[13 ~ 20]选择合适的RNA 作为目的基因,采用RT-qPCR 技术来测定活性病原菌.本研究以水环境中2 种典型

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